| 我們在國科會科發基金經費支助下於2012年11月16至25日赴美國堪薩斯州立大學獸醫學院研習新流感、豬群流感ELISA抗體檢測與H3N2流感變異株（H3N2v）抗原檢測方法。目前流感病毒HA及NA抗體檢測大多以紅血球凝集抑制試驗(HItest)及神經胺酸酶抑制試驗(NItest)進行,其中NItest過程既繁瑣又耗時,本試驗希望發展ELISA檢測方式取代傳統的NItest。針對NA基因建構細胞表現質體,以哺乳類細胞表現H1N1新流感病毒之NA重組蛋白,經純化後製備成ELISA抗原盤。將HI抗體力價1280倍之H1N1新流感病毒感染豬血清做2倍序列連續稀釋,各稀釋階以ELISA抗原盤測試,結果顯示可得到線性化曲線,亦可區別H1N1新流感病毒與同源的北美三重組型豬流感病毒誘發產生之抗體。2012年美國一位婦女因感染H3N2v而死亡的個案引起社會大眾恐慌,國內流感專家學者呼籲國內應盡速建立H3N2v流感變異株的快速診斷技術,因此本試驗亦研發以RT-PCR快速鑑別H3N2v之檢測方法。針對H3N2v流感病毒變異株之M、HA及NA基因分別設計特異性引子,在台灣先經初步測試後帶到美國實驗室,以其提供之H3N2v、新型流感H1N1、人類季節流感H3N2及傳統豬流感病毒進行RT-PCR反應。結果顯示,3對引子特異性高,可以多引子(Multiplex)RT-PCR方式快速檢測及區別H3N2v流感變異株及H3N2豬型流感病毒。 |