本次三個月短期計劃,主要是前往美國加州希望之城(CityofHope)醫院/貝克曼醫學研究中心,史竹支教授實驗室學習人體幹細胞體外培養及組織工程再造之技術。體外幹細胞培養之技術包涵人體血液及骨髓分離出CD34+Lin-之Hematopoieticstemcell以及Bonemarrowmesechymalstemcell(CD34-CD45R+Lin-為主)之純化技術,同時利用流產胚兒胎腦部組織之下腦室周圍(SubventricularZone;SVZ)培養出人體胎兒腦神經幹細胞(Humanfetalbrainstemcell)。同時史教授實驗近年已利用Severecombinedimmunodeficiency(SCID)mice做為人體胚胎組織培育之動物模型─SDIC-humicemodel,特別已成功將人類胰島組織可經由此種(動物體內無排斥反應)SCID-hu體內組織再生工程(Tissueengineering),而使得在三個月內可組織增生至30-40倍,同時增生之組織經由免疫單株抗體染色,確定其有成熟分化之胰島小體,並且可分泌出胰島素(Insulin)之功能性蛋白,以及昇糖激素(Glucagon)和Somatostatin之功能性蛋白等。此外,我們也利用經由人類胰臟胰島管(Pancreaticduct)周圍組織分離出具多型分化之胰島幹細胞,由於全世界科學仍無法確定此類胰島幹細胞(Pancreaticstemcell;PSC)所帶有之特定生物標的(Biomarker),因此我們也利用小鼠反轉錄幹細胞病毒(MurineStemcellvector)來攜帶Greenfluorescencegene(GFP)進入PSC細胞中,並經細胞流速儀純化95%以上PSC-GFP(+)細胞之步驟,再進入SCIDmice中以觀察此種PSC-GFP(+)細胞是否可成功分化成人類胰島小體(PancreaseIslet),並具有分泌Insulin、glucagon、somatostatin等蛋白質功能。 |